肝脏 ›› 2019, Vol. 24 ›› Issue (10): 1186-1189.

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肝组织切片不同保存时间抗原丢失比较

陈高峰, 马园园, 陶艳艳   

  1. 201203 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所(陈高峰,马园园,陶艳艳);上海市中医临床重点实验室(陶艳艳)
  • 收稿日期:2018-12-18 发布日期:2020-03-27
  • 通讯作者: 陶艳艳,Email:taoyanyan1023@126.com
  • 基金资助:
    上海市科委科技专项资助(19401901500)

  • Received:2018-12-18 Published:2020-03-27

摘要: 目的 观察肝组织切片室温条件下存放不同时间,组织细胞抗原变化。方法 复制大鼠肝纤维化模型,30% CCl4橄榄油溶液2 mL·kg-1皮下注射,每周2次,共计6周;第7周开始加10 mg·kg-1·d-1 2-AAF灌胃3周,9周末处死大鼠。大鼠肝组织连续切片12张,分成3组(分别用于HE、天狼猩红胶原与免疫组化染色),每组4张(用于0、24、48、96周共4个不同时间点)。切片于常温空气中分别放置0、24、48、96周时浸蜡封片,96周时全部切片脱蜡至水进行HE染色、天狼猩红胶原染色及细胞膜蛋白抗原CK7、细胞浆蛋白抗原SHH与细胞核蛋白抗原HNF 4α免疫组化染色,观察肝组织炎症情况及Image-Pro Plus 6.1软件分析胶原面积与不同部位组织细胞抗原变化。结果 组织切片室温放置0~96周肝脏炎症无明显改变;随着放置时间从0周延长至96周,胶原面积逐渐减少,96周时显著减少为0周的64.54%~74.44%(P<0. 05)。免疫组化染色显示,0周CK7阳染面积为12.70%±0.90%;随着放置时间延长,CK7阳染色面积逐渐减少,24、48与96周时CK7阳染面积分别为0周的71.02%、47.01%与35.16%(P<0.05);0周SHH阳染面积为45.44%±6.11%,随着放置时间延长,24、48与96周时SHH阳染面积分别占0周的49.38%、26.32%与20.77%(P<0.01);0周HNF4α阳染面积为9.38%±0.62%;随着放置时间延长,24、48与96周时HNF4α阳染面积分别占0周的47.76%、14.50%与11.41%(P<0. 05)。结论 肝组织切片室温条件下不同保存时间的细胞膜、细胞浆、细胞核抗原明显丢失,切片浸蜡封片能防止组织细胞抗原丢失。

关键词: 切片, 抗原丢失, 保存时间, 室温条件