摘要： 目的 探讨沉默USP9X对肝癌HepG2细胞周期和自噬的作用机制。方法 采用siRNA技术沉默USP9X在肝癌HepG2细胞株中的表达,实验分为siRNA组和阴性对照(NC)组;采用MTT法检测细胞增殖率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用western blot检测细胞中USP9X、LC3-II以及Beclin-1蛋白的表达。结果 转染siRNA后,siRNA组中USP9X蛋白表达明显低于NC组(0.44 ± 0.15 vs. 1.00 ± 0.00,P<0.05);MTT结果表明在HepG2细胞株在沉默24 h、48 h和72 h室的细胞增殖率分别为 0.0873 ± 0.0131、0.1047 ± 0.0128和0.1203 ± 0.0148,分别明显低于NC组的0.1113 ± 0.0083、0.1333 ± 0.0062和0.1610 ± 0.0080(P<0.05);流式细胞术结果表明在siRNA组中,处于G0-G1期的HepG2细胞数量明显高于NC组(72.32% ± 1.53% vs. 56.30% ± 3.47%,P<0.05),处于S期的HepG2细胞数量明显低于NC组(20.53% ± 0.66% vs. 37.73% ± 1.82%,P<0.05);western blot结果表明siRNA组中的Beclin-1和LC3-II蛋白表达明显高于NC组(1.47 ± 0.19 vs. 1.00 ± 0.00,1.48 ± 0.11 vs. 1.00±0.00,均P<0.05)。结论 USP9X基因沉默可通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞自噬进而有效抑制肝癌HepG2细胞的过度增殖。
